以下是豬黃體生成素(LH)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合整理：

　　BS-4691 豬黃體生成素(LH)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒組成

　　預(yù)包被板條?：96孔或48孔微孔板(可拆卸)

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：通常包含6個(gè)濃度梯度(如0-160 ng/mL)

　　檢測(cè)溶液?：包括HRP標(biāo)記抗體、TMB底物、終止液等

　　洗滌液?：30倍濃縮液，需蒸餾水稀釋

　　二、樣本處理

　　血清/血漿?：采集后室溫靜置1-2小時(shí)，3000rpm離心15分鐘，避免溶血或反復(fù)凍融

　　組織勻漿?：用預(yù)冷PBS(含蛋白酶抑制劑)研磨，5000×g離心取上清

　　保存條件?：短期存于2-8℃，長(zhǎng)期需-20℃以下保存

　　三、實(shí)驗(yàn)步驟

　　平衡試劑?：所有試劑室溫平衡30分鐘后再使用

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔：50μL梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品

　　樣本孔：10μL樣本+40μL稀釋液

　　孵育?：37℃避光溫育60分鐘，需加蓋封板膜防止蒸發(fā)

　　洗滌?：手工洗板需重復(fù)5次，拍干殘留液體

　　顯色?：每孔加TMB底物50μL，37℃避光顯色15分鐘

　　終止與檢測(cè)?：加終止液后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值

　　四、注意事項(xiàng)

　　操作規(guī)范?：避免底物接觸金屬器具，顯色后及時(shí)終止

　　質(zhì)量控制?：建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣本做復(fù)孔，減少誤差

　　失效提示?：若標(biāo)準(zhǔn)曲線R2<0.99需重試

　　五、結(jié)果計(jì)算

　　通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合方程計(jì)算樣本濃度，線性范圍為9.375-600 mIU/mL。

　　如需更詳細(xì)說(shuō)明，可參考具體試劑盒附帶的說(shuō)明書(shū)。

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